產品屬性:
中文名稱:活性氧檢測試劑盒
英文名稱:Reactive Oxygen Species Assay Kit
產品規(guī)格:100T~500T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是一種利用熒光染料DCFH-DA進行細胞內活性氧水平檢測的常用方法。檢測原理在于DCFH-DA本身無熒光,能自由穿過細胞膜,一旦進入細胞后,被胞內的酯酶水解生成無熒光的DCFH。DCFH不能穿透細胞膜,從而保留在胞內。此時胞內的活性氧可以氧化DCFH生成有熒光的DCF。通過DCF熒光的強弱即可反映活性氧的水平。因檢測對象和反應體系的不同,本試劑盒可檢測100-500個樣品。
保存:-20oC保存,有效期一年。
我們科研實驗室: 實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,*將組織剪成1mm3左右大?。?
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞*;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlEphrin A5 酪蛋白激A5受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
EDA2R/TNFRSF27 瘤壞死因子受體家族成員27抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗體 規(guī)格: 0.1ml
TTI1 轉錄因子相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
OGFOD1 末端多聚苷酸1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
NOX5 還原型輔Ⅱ氧化5/嘌呤二核苷酸磷酸抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD99/E2 antigen CD99抗體 規(guī)格: 0.2ml
FEM1A 前列素E受體4相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CASD1/C7orf12 第七號染色體開放閱讀框12抗體 規(guī)格: 0.2ml
ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體 0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1ml
活性氧檢測試劑盒Pheretima地龍?zhí)结樂?/span>PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DDIT4/REDD1 DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Trichothecium spp.單端孢霉屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TGF Beta 1(CT) 轉化生因子β1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Strongylus vulgaris 尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Caveolin-3 細胞質膜微囊蛋白-3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cortex mori桑白皮LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Goat IgM/APC APC標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結節(jié)疹病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周TDP-43 Tar DNA 結合蛋白43抗體 規(guī)格: 0.1ml
Hyostrongylus rubidus紅色豬圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-NMDAR2B (Tyr1252) 磷酸化谷受體2B抗體 規(guī)格: 0.1ml
Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens菜豆細性萎蔫病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FAM40A FAM家族蛋白40A抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba lobeliae chinensis半邊蓮PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周HSP90 α 熱休克蛋白90α抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rotavirus E輪狀病毒E群RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DCHS1 鈣粘蛋白19抗體 規(guī)格: 0.2ml
Canine Parvo Virus(CPV)犬細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD3 epsilon CD3抗體 0.1ml
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英文名稱:Reactive Oxygen Species Assay Kit
產品規(guī)格:100T~500T
發(fā)貨周期:1~3天
本試劑盒是一種利用熒光染料DCFH-DA進行細胞內活性氧水平檢測的常用方法。檢測原理在于DCFH-DA本身無熒光,能自由穿過細胞膜,一旦進入細胞后,被胞內的酯酶水解生成無熒光的DCFH。DCFH不能穿透細胞膜,從而保留在胞內。此時胞內的活性氧可以氧化DCFH生成有熒光的DCF。通過DCF熒光的強弱即可反映活性氧的水平。因檢測對象和反應體系的不同,本試劑盒可檢測100-500個樣品。
保存:-20oC保存,有效期一年。
我們科研實驗室:
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,*將組織剪成1mm3左右大?。?
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織完全被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞*;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,*在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
phospho-CDKN1A/P21 (Thr145) 磷酸化p21蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlEphrin A5 酪蛋白激A5受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
EDA2R/TNFRSF27 瘤壞死因子受體家族成員27抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-Cyclin E(Thr395) 磷酸化周期素E抗體 規(guī)格: 0.1ml
TTI1 轉錄因子相互作用蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml
OGFOD1 末端多聚苷酸1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
NOX5 還原型輔Ⅱ氧化5/嘌呤二核苷酸磷酸抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD99/E2 antigen CD99抗體 規(guī)格: 0.2ml
FEM1A 前列素E受體4相關蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
CASD1/C7orf12 第七號染色體開放閱讀框12抗體 規(guī)格: 0.2ml
ABCB6 ATP結合蛋白家族6抗體 0.1ml
Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) 磷酸化馬鈴薯球蛋白(結節(jié)性硬化)抗體 規(guī)格: 0.1ml
活性氧檢測試劑盒Pheretima地龍?zhí)结樂?/span>PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周DDIT4/REDD1 DNA損傷誘導轉錄蛋白4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Trichothecium spp.單端孢霉屬通用LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周TGF Beta 1(CT) 轉化生因子β1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Strongylus vulgaris 尋常圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Caveolin-3 細胞質膜微囊蛋白-3抗體 規(guī)格: 0.2ml
Cortex mori桑白皮LAMP鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周Rabbit Anti-Goat IgM/APC APC標記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml
Bovine Lumpy Skin Disease Virus(LSDV)牛結節(jié)疹病毒LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 1-2周TDP-43 Tar DNA 結合蛋白43抗體 規(guī)格: 0.1ml
Hyostrongylus rubidus紅色豬圓線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周Phospho-NMDAR2B (Tyr1252) 磷酸化谷受體2B抗體 規(guī)格: 0.1ml
Curtobacterium flaccumfaciens pv. flaccumfaciens菜豆細性萎蔫病PCR試劑盒 植物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周FAM40A FAM家族蛋白40A抗體 規(guī)格: 0.2ml
Herba lobeliae chinensis半邊蓮PCR鑒定試劑盒 中藥材鑒定試劑盒/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-4周HSP90 α 熱休克蛋白90α抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rotavirus E輪狀病毒E群RT-LAMP試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周DCHS1 鈣粘蛋白19抗體 規(guī)格: 0.2ml
Canine Parvo Virus(CPV)犬細小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 動物病原微生物檢測(科研用)/定做種屬檢測試劑盒 50次 低溫 負20度 一年 2-3周CD3 epsilon CD3抗體 0.1ml